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黄原胶寡糖诱抗生物活性的探索

发布日期:2015-06-08 15:42:33
植物体内存在潜在抗病性,受到外界损害和病原物侵染的植物可通过激 发子和诱导剂(imiucer)激活植物抗病基因,使植物产生系统抗病性,以免 受到进一步的伤害,这一现象己在许多研究中得到证实。其中,寡聚糖作为 —种新型生物诱抗剂已在许多作物上得到应用,越来越受到人们广泛关注。 寡聚糖种类很多,目前常见的有葡聚寡糖、寡聚半乳糖醛酸、几丁质寡糖和 壳寡糖等可激活植物的防卫系统,提髙植物自身免疫力[14、
活性寡聚糖是一类由3?10个单糖组成,具有一定结构和生物活性的聚合 体,国际上研究较多的是植物及微生物细胞壁多糖降解的寡糖片断。越来越 多的试验结果表明,植物细胞壁不仅起到防御的结构屏障作用,而且受到病 菌慼染时能起到积极防御反应。一方面,植物细胞壁酶水解病原菌细胞壁中 的P-肽葡聚糖几丁质等,产生活性成分,诱导植物植保素等合成酶系基因表 达;另一方面,病菌入侵植物时,必须水解植物细胞壁的多糖,其降解产物 也能诱导植保素合成。因此,寡聚糖可有效地诱导植物产生防御反应,激活 植物的系统性获得免疫反应。
根据这一理论,由十字花科植物致病菌野油菜黄单孢菌分泌的黄原胶的 寡糖碎片很可能拥有植物的诱抗活性。
实验方法:
大豆子叶法(Soybean Cotyledon Bioassay) [15】:
豆科植物在受到病原体侵染时,能通过莽草酸途径、醋酸-丙二酸途径或 醋酸-甲羟戊酸途径,产生以异黄酮类为主的植保素,直接杀死入侵的病原体, 抑制病斑的:扩大。在外源激发子的处理下豆科植物也能够产生抗性反应,合 成植保素。大豆子叶法就是利用激发子处理大豆子叶,然后通过测定子叶产 生的植保素的量,来表示激发子诱导植物抗性活性的方法。
大豆的培养:大豆种子用水洗净后,用8%次氯酸钠溶液灭菌20min,再 用无菌水冲洗干净,暗光震荡24h。次日将种子播种在铺有蛭石的培养盒中, 置于培养箱中(光照:黑暗=16h: 8h)交替培养10d,待大豆长出两片真叶 后即可进行活性测定。
活性测定方法:
剪下已经长出两片真叶的大豆子叶,用8%次氯酸钠溶液灭菌5min,然 后用无菌水冲洗干净,再用滤纸吸干。在无菌条件下用刀片削去子叶外表皮 厚约1mm,直径约6mm的伤口,用无菌水浸泡清洗,约3〇sec后取出,用 滤纸拭干后放入铺有湿滤纸培养皿中,每皿放10片子叶作为一个处理。每个 样品五个处理,每处理重复两次,对照用水。取配置好的样品溶液(含有 2mg/ml的链霉素)10W加在伤口上。处理后的子叶在25°C黑暗的温箱中培 养24h,将每皿中的子叶转移到一个盛有10ml双蒸水的试管中,充分展荡后 测定0D286〇 结果及讨论:
黄原胶寡糖具有一定的植物诱抗活性,当寡糖浓度为lOOOppm时达最高 值0J3,与对照相比具有显著性的差异。低剂量时壳寡糖的植物诱抗活性要 略髙于黄原胶寡糖(见图4-9, 4-10)。
对黄原胶寡糖的生物学活性进行了探讨,发现:
(1)黄原胶寡糖具有很强的体外清除活性氧的能力,对羟自由基、超氧阴 离子自由基、DPPH自由基均有不同程度的清除作用。同时对由H202 诱导的小鼠红细胞溶血具有很好的抑制作用。
(2)黄原胶寡糖有一定的抑制皮肤浅部真菌生长的作用。
(3)黄原胶寡糖几乎没有ACE抑制活性。
(4)黄原胶寡糖有较强的植物诱抗活性。
 
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